内容简介
《真菌毒素与粮食食品安全》靶向粮食食品安全领域，重点聚焦粮食及其制品中主要真菌毒素污染问题，包括粮食及其制品中真菌毒素快速定性与精准定量分析、粮食及其制品中真菌毒素毒性评价及风险评估、粮食及其制品中真菌毒素污染安全控制、展望等四个部分，概括了近5年来国内外在真菌毒素与粮食食品安全方向的*新研究进展，详细讨论并提出高效、安全解决粮食食品真菌毒素污染的可靠途径。
目录
目录
第1章 粮食及其制品中真菌毒素快速定性与精准定量分析 1
1.1 样品前处理 1
1.2 快速免疫分析 4
1.2.1 酶联免疫吸附分析 4
1.2.2 免疫胶体金试纸条 4
1.2.3 荧光免疫分析 5
1.2.4 免疫传感器技术 6
1.3 生物传感分析 6
1.3.1 生物传感方法简介 6
1.3.2 生物传感方法在真菌毒素检测中的应用 7
1.4 液相色谱-串联质谱定量分析 13
1.4.1 质谱的功能和技术原理 13
1.4.2 电离技术 14
1.4.3 质量分析器 14
1.4.4 液相色谱-串联质谱在真菌毒素检测中的应用 16
1.5 气相色谱-质谱定量分析 17
1.5.1 GC基本原理 17
1.5.2 GC-MS联用技术原理 18
1.5.3 GC-MS定量分析技术 18
1.5.4 GC-MS技术在真菌毒素检测中的应用 20
1.5.5 GC-MS定量分析技术的优势与局限性 21
1.5.6 GC-MS技术在真菌毒素检测中的应用前景 22
1.6 基质辅助激光解吸电离-飞行时间质谱成像分析 22
1.6.1 MALDI-TOF-MSI概述 22
1.6.2 MALDI-TOF-MSI的优势与挑战 24
1.6.3 MALDI-TOF-MSI在真菌毒素检测中的应用 25
1.6.4 MALDI-TOF-MSI发展趋势和未来展望 27
参考文献 28
第2章 粮食及其制品中真菌毒素毒性评价及风险评估 35
2.1 真菌毒素的细胞快速毒理学评价 35
2.1.1 真菌毒素的细胞快速毒理学评价概述 35
2.1.2 真菌毒素毒理评价的主要细胞类型 35
2.1.3 细胞快速毒理学评价的相关指标及检测方法 38
2.1.4 真菌毒素细胞快速毒理学联合评价 43
2.1.5 真菌毒素细胞快速毒理学评价的局限性及展望 43
2.2 模式动物安全性评价 44
2.2.1 小鼠模型安全性评价 44
2.2.2 斑马鱼模型安全性评价 47
2.3 靶动物安全性评价 50
2.3.1 脱氧雪腐镰刀菌烯醇 51
2.3.2 玉米赤霉烯酮 53
2.3.3 伏马毒素 54
2.4 外暴露风险评估 56
2.4.1 真菌毒素风险评估的过程 56
2.4.2 国内外粮食作物中真菌毒素外暴露风险评估研究现状 57
2.4.3 国内外杂粮中真菌毒素外暴露风险评估研究现状 62
2.4.4 国内外啤酒中真菌毒素风险评估研究现状 65
参考文献 69
第3章 粮食及其制品中真菌毒素污染安全控制 76
3.1 物理防控技术 76
3.1.1 物理分选 76
3.1.2 物理吸附 76
3.1.3 热处理 78
3.1.4 辐射处理 78
3.1.5 低温等离子体处理 79
3.2 化学防控技术 79
3.2.1 氧化法 79
3.2.2 还原法 79
3.2.3 加碱法 80
3.2.4 高级氧化技术 80
3.3 生物源性安全控制 82
3.3.1 生物菌剂 82
3.3.2 酶制剂 92
3.3.3 天然活性物质 105
3.4 生物合成关键因子 108
3.4.1 DON的生物合成过程—单端孢霉烯基因簇基因 109
3.4.2 基因簇内部的特异性转录因子 111
3.4.3 环境因素应答转录因子 112
3.4.4 营养感应转录因子研究 113
3.4.5 链格孢真菌中控制链格孢毒素生物合成的关键因子 116
3.5 数据驱动的毒素生物转化预测工具及其应用 121
3.5.1 基于反应规则的毒素生物转化预测工具 122
3.5.2 基于酶底物杂泛性毒素生物转化预测深度学习模型 127
参考文献 132
第4章 展望 150
试读
第1章 粮食及其制品中真菌毒素快速定性与精准定量分析
1.1 样品前处理
样品前处理是样品分析中的关键步骤之一，旨在消除基质干扰、提升方法的精密度、准确度、灵敏度和选择性，是确保检测结果可靠、准确的重要前提。前处理过程包括样品制备、提取、分离纯化和浓缩等步骤，以便在复杂基质中*大限度地提取待测组分，进而进行定性和定量分析（崔东伟，2021）。谷物及其制品常含有蛋白质、油脂等杂质，基质复杂，但真菌毒素的含量极少。因此，实现真菌毒素的精准检测依赖于高效、快速的前处理方法。目前，真菌毒素的前处理方法主要包括液-液萃取（liquid-liquid extraction，LLE）、固相萃取（solid-phase extraction，SPE）、QuEChERS、凝胶渗透色谱（gel permeation chromatography，GPC）、免疫亲和层析（immunoaffinity chromatography，IAC）和免疫磁珠（immunomagnetic beads，IMBs）等技术。
LLE是一种传统的提取方法，广泛应用于真菌毒素的萃取，具有操作简单、通用性强等优点（Yu et al.，2023）。其原理是通过样品中不同组分在两种不相容液相中的溶解度或分配系数的差异实现目标化合物的分离和富集，常用乙腈/水或甲醇/水体系（Antony et al.，2021）。尽管LLE操作简单便捷，但存在有机溶剂消耗大、难以满足高通量检测需求以及目标物易流失等缺点（Badawy et al.，2022）。通过添加无机盐（如NaCl）提升分配系数，LLE的萃取效率可进一步提高（Bokhary et al.，2021）。例如，Salim等（2021）将LLE应用于米糠中黄*霉毒素（aflatoxins，AFs）和赭*霉毒素（ochratoxins，OTs）等多种真菌毒素的同时检测，获得了较高的提取回收率和良好的线性关系。Slobodchikova和Vuckovic（2018）将乙酸乙酯用于脱氧雪腐镰刀菌烯醇（deoxynivalenol，DON）和黄*霉毒素B1（AFB1）等17种真菌毒素的萃取，大幅降低了基质效应且无需免疫亲和柱，降低了检测成本。
SPE基于吸附剂的特性实现目标化合物与干扰物的有效分离，随后用合适的洗脱液将目标化合物从固体吸附剂中洗脱，完成分离和富集（孙学丽和王丽娟，2022）。作为一种广泛应用的传统吸附萃取技术，SPE具备高效、稳定、重现性好等优点（姚建华，2020），但其溶剂和样品消耗量较大，检测成本较高（邓龙等，2023）。与LLE相比，SPE可以依据目标物的结构和样品基质的特点选择合适的吸附剂，在目标分析物的富集和纯化方面效果更佳（崔东伟，2021）。例如，Yu等（2023）利用亲水-疏水平衡SPE柱从水果中提取真菌毒素，平均回收率达85%～108%。黄忠亮等（2024）建立了结合自动SPE的液相色谱-串联质谱法测定杂粮中14种真菌毒素，结果表明检测灵敏、准确，适用于多种谷物样品。
QuEChERS是一种新型的快速样品前处理技术，具有快速（quick）、简便（easy）、便宜（cheap）、高效（effective）、耐用（rugged）、安全（safe）等特点（李俊超等，2021）。其方法简单，样品经有机溶剂提取后，用盐析或离心除水，再用乙二胺-N-丙基硅烷化硅胶等吸附剂净化（孙学丽和王丽娟，2022）。QuEChERS具备溶剂用量少、回收率高等优势，特别适用于食品基质中真菌毒素的提取（崔东伟，2021）。例如，在对坚果中真菌毒素的定量研究中利用QuEChERS方法，能有效地减少基质效应，同时实现溶剂用量少和较高的回收率（75%～98%）（Alcántara-Durán et al.，2019）。殷锡峰等（2024）利用QuEChERS-超高效液相色谱-串联质谱法检测多种粮食作物中7种真菌毒素残留，方法快速、灵敏度高，适用于多种基质样品。Miró-Abella等（2017）则利用该技术分析了植物型饮料中的AFs和其他毒素，回收率达80%～91%，结果良好。
GPC基于分子量筛分原理，通过不同分子量物质在多孔聚合物凝胶中的滞留时间差异，实现待测物与基质的有效分离（何丽，2024）。GPC的填料通常选用交联聚苯乙烯二乙烯基苯，具有较强的热稳定性、化学惰性和优良的力学性能；在流动相选择方面，多使用无水乙腈、甲苯或其他有机溶剂，以确保溶剂毒性低、化学性质稳定。GPC的优势在于操作效率高、适用范围广、可重复试验且具有较大的净化容量（傅小红，2022）。例如，Kholif等（2021）将GPC用于油料种子中AFs的检测，验证出玉米谷物中AFs污染的风险更高，并为AFs风险评估和管理提供了有效支持。
IAC技术基于生物大分子之间的特异性识别和可逆结合，将抗体固定于固定相载体上，以实现目标物与干扰物的高效分离，进而确保检测结果的准确性（桑晓霞等，2019）。IAC多针对单一种类真菌毒素净化，通用性较差且不适合高通量检测（牛灿杰等，2023），但是在复杂基质中可实现目标物的高效富集和纯化，并减少有毒试剂的使用，具有绿色环保和特异性强等优点（戴宇琪等，2024）。例如，Wang等（2024）使用免疫亲和柱对食品和饲料样品中的玉米赤霉烯酮（zearalenone，ZEN）进行检测，展现出良好的回收率（92.46%～105.48%）和可接受的相对标准偏差。刘
